La transcriptase inverse (RT) SuperScript™ IV est un mutant exclusif du virus de la leucémie murine de Moloney (M-MLV) avec une robustesse et une fiabilité élevées dans les réactions de transcription inverse. Elle affiche une résistance aux inhibiteurs, une processivité et une vitesse de réaction sensiblement améliorées par rapport à SuperScript™ III, tout en conservant tous les avantages de l’enzyme précédent, notamment une thermostabilité supérieure, une synthèse d’ADNc très efficace sur toute la longueur et une activité RNase réduite. La RT SuperScript™ IV est conçue pour offrir une synthèse rapide, fiable et homogène de l’ADNc, en présence d’inhibiteurs dans un grand nombre d’échantillons, qui empêchent d’autres RT actuellement disponibles d’agir efficacement.
La RT SuperScript™ IV est le choix idéal pour toutes les applications RT-PCR et qRT-PCR de la gamme de produits SuperScript™. Nous la recommandons tout particulièrement lorsque la reproductibilité et la fiabilité sont des préoccupations majeures et lorsque les inhibiteurs de l’échantillon d’ARN risquent d’interférer avec la synthèse d’ADNc, conduisant à des résultats biaisés dans les études d’expression génétique.
Les caractéristiques de la transcriptase inverse SuperScript™ IV comprennent :
• Meilleure résistance à toute une variété d’inhibiteurs qui peuvent interférer avec la synthèse d’ADNc
• Synthèse d’ADNc spécifique et robuste dans une large gamme de types d’échantillons
• Réaction catalysée par la transcriptase inverse plus rapide, avec une réduction du temps d’incubation qui passe de >50 minutes à 10 minutes
• Processivité bien meilleure par rapport à la RT SuperScript™ III
Source
Purifiée à partir d’E. coli exprimant le gène pol de M-MLV, modifié pour augmenter la thermostabilité et la demi-vie, la processivité, la résistance aux inhibiteurs et pour réduire l’activité RNase H.
Tests de performance et de qualité
Dosages d’endodésoxyribonucléase, d’exodésoxyribonucléase et de ribonucléase ; et rendement et longueur du produit d’ADNc.
Définition de l’unité
Une unité de la RT SuperScript™ IV représente la quantité d’enzymes requise pour incorporer 1 nmole de désoxyribonucléotide dans une substance précipitable à l’acide, en 10 min, à 37°C, en utilisant poly(A) oligo(dT)12-18 comme modèle/amorce.
Conditions de réaction de l’unité
50 mM de Tris-HCl (pH 8,3), 4 mM de MgCl 2 , 10 mM de DTT, 50 mM de KCl, 0,5 mM de dTTP, 0,4 Mbq/ml de [ 3 H]-dTTP, 0,4 mM de poly(A) oligo (dT)12-18 et enzyme dans 20 μl pendant 10 min à 37°C.
